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Séquençage de l'ARNm pour l'analyse de l'expression différentielle des gènes

Differential Gene Expression
 
 
Utilisez le séquençage de l'ARNm pour :
  • Comparer des profils d'expression génétique obtenus dans des conditions différentes
  • Étudier les profils génétiques du niveau de la transcription à celui de la voie de transmission

Aperçu

Considérations avant de commencer un projet de séquençage d'ARNm :

  • Enrichissement en poly(A) ou ribo-dépletion ?
  • Profondeur de séquençage (sensibilité) ?
  • Réplicas (indice de confiance) ?
  • Organisme modèle ou pas de génome de référence disponible ?
  • Complexité de la bibliothèque ?

Laissez-nous vous guider - de la conception à l'analyse

Exemples de projets utilisant le séquençage de l'ARNm :

  • Études des protéines fonctionnelles et des voies moléculaires
  • Des changements dans l'expression des gènes provoqués par une maladie
  • Expériences liées à la perte, le gain ou au rétablissement d'une fonction
  • Partie d'un projet de caractérisation en sciences omiques
  • Changements fonctionnels dus aux interactions entre les espèces
  • Découverte de nouveaux gènes ou d'ARN régulateurs non codants
  • Détection des variants d'ARN
  • Tests de médicaments

Demandes relatives au séquençage de l'ARNm :

  • Génération du transcriptome de référence
  • Shotgun métatranscriptomique
  • Séquençage de petits ARN

Déroulement

 
Le graphique ci-dessous illustre un déroulement typique d'un projet de séquençage de l'ARNm. Veuillez noter que nos processus hautement modulaires vous offrent diverses options d'entrée et de sortie. Si vous externalisez l'ensemble de votre projet NGS à Microsynth ou seulement une partie de celui-ci, c'est à vous de décider.
 

 

Pour plus d'informations et une description technique détaillée, veuillez télécharger notre note d'application sur le séquençage de l'ARN d'Illumina (voir les téléchargements correspondants).

Résultats

 
Les résultats produits par notre module d'analyse du séquençage de l'ARNm permettent de répondre à cinq questions principales d'une expérience de séquençage de l'ARNm.
 
  1. Y a-t-il différents modes d'expression dans une expérience ? (voir figure 1)
  2. Quels sont les principaux gènes exprimés de manière différentielle ? (voir figure 2)
  3. Quelles sont les statistiques détaillées de tous les gènes mesurés ? (voir figure 3)
  4. Quelles voies peuvent influencer les phénotypes observés ? (analyse des voies, voir figure 4)
  5. Parmi les transcriptions alternatives possibles, lesquelles sont exprimées au moment de l'expérience ? (analyse d'épissage alternatif,  voir figure 5)

 

Figure 1: Cette heatmap est basée sur les modèles d'expression des échantillons et montre leur similarité les uns par rapport aux autres. Elle permet ainsi de déterminer si les conditions utilisées dans l'expérience conduisent à des schémas d'expression différents.

 

Figure 3: Pour une étude approfondie, pour tous les gènes mesurés, des statistiques détaillées sont listées. Exemple : log fold et sa significativité.

 

Figure 5: L'analyse de l'épissage alternatif permet d'identifier la transcription la plus probable d'un gène au moment de l'expérience.

Figure 2: La deuxième heatmap montre les gènes régulés à la hausse et à la baisse à partir d'une comparaison par paires de deux conditions (par exemple, le facteur de stress par rapport au contrôle).

 

Figure 4: L'analyse de l'enrichissement des voies permet d'identifier les voies régulées de manière différentielle qui, à leur tour, peuvent expliquer les phénotypes observés.

Délai d'Exécution

  • Livraison des données dans les 25 jours ouvrables suivant la réception de l'échantillon (y compris la préparation de la bibliothèque et le séquençage)
  • 5 jours ouvrables supplémentaires pour l'analyse des données (bioinformatique)
  • Service express possible sur demande