Back to top

PCR - un Outil Puissant pour de Multiples Applications

 

Microsynth propose un service complet qui commence de l'extraction des échantillons jusqu'à la production de données de haute qualité. Choisir d'externaliser votre application PCR vous permet d'économiser du temps et des efforts, mais aussi de bénéficier d'une expertise technique et d'installations dédiées à la réalisation de diverses expériences basées sur la PCR.

 

Aperçu de la PCR Digitale vs. la PCR en Temps Réel vs. la PCR en Point Final:

  PCR Digitale PCR en Temps Réel PCR Point Final
Vue d'Ensemble Le réarrangement de l'échantillon en milliers de nanolitres de réactions PCR en point finale permet de déterminer la concentration absolue de l'analyte.

Mesure l'accumulation du produit d'amplification PCR au fur et à mesure.

 

Mesure la quantité de produit PCR accumulé à la fin des cycles PCR.

 

Quantitatif ? Oui, la compartimentation de l'analyte correspond à une distribution de type Poisson.

Oui, les données sont collectées pendant la phase de croissance exponentielle (log) de la PCR lorsque la quantité de produit de PCR est directement proportionnelle à la quantité initiale de l'analyte.

Non, mais l'estimation approximative de la quantité de produit PCR accumulé donne des résultats "semi-quantitatifs".
Applications
  • Quantification absolue de la charge virale
  • Quantification absolue de l'ADN ou de l'ARN
  • Détection d'allèles rares (Mutation ou SNPs dans les biopsies liquides)
  • Quantification absolue de l'expression des gènes
  • Détection de l'édition du génome
  • Variation du nombre de copies (ex : contrôle de la qualité des CAR-T et d'autres thérapies cellulaires)
  • Surveillance de l'environnement
  • Quantification de l'ADN résiduel
  • Quantification de l'expression des gènes
  • Vérification des puces à ADN
  • Contrôle de la qualité et validation d'analyses
  • Détection des agents pathogènes
  • Analyse des micro-ARN
  • Quantification virale    expériences
  • siRNA/RNAi

 

 

 

Amplification de l'ADN pour :

  • le séquençage
  • Génotypage
  • Clonage

 

 

 

 

 

 

 

 

Résumé

La PCR digitale est la méthode de choix quand :

  • Les références ou les normes sont difficilement disponibles
  • Vous avez besoin d'une quantification robuste (haute tolérance aux inhibiteurs de la PCR)    vous cherchez à quantifier des cibles rares dans des contextes complexes
  • Vous cherchez à détecter les petits changements de Fold, là où la PCR en temps réel échoue

La PCR en temps réel est la méthode de choix quand :

  • vous mesurez l'analyte dans une gamme dynamique très large allant jusqu'à 9 Logs
  • vous vous attendez à ce que la concentration d'analytes change de plus de 2 Logs
  • vous voulez faire un dépistage à haut débit rentable

 

 

La PCR en point final est la méthode de choix quand :

  • vous avez besoin d'une discrimination précise basée sur la taille
  • vous amplifiez un locus spécifique de l'ADN/ARN pour une analyse plus détaillée
  • vous voulez confirmer la présence du locus spécifique dans votre ADN/ARN