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Nanopore (ONT) AAV-Genomsequenzierung

Nanopore (ONT) AAV-Genomsequenzierung
 
 
Vollständige AAV-Genome aus intakten Kapsiden entschlüsseln – schnell und effizient.
Erkennen Sie subgenomische Varianten, bewerten Sie die Integrität und entdecken Sie strukturelle Konfigurationen, die mit Kurzlesemethoden möglicherweise übersehen werden.

Was Sie erreichen können:

  • Nachweis von subgenomischen Varianten wie verkürzten, invertierten oder Snapback-Genomen (SBG)
  • Erzeugung vollständiger Konsensussequenzen aus nativer rAAV-DNA
  • Erhalt intakter ITRs und nativer Genomstrukturen ohne PCR-Artefakte
  • Bewertung der strukturellen Integrität und Heterogenität von Vektorpräparationen
  • Interaktive Genomkarten und quantitative Metriken zur Genomzusammensetzung

Bevor Sie starten

Um Ihr Projekt optimal vorzubereiten, klären Sie bitte:

  • Was ist das Probeninput (Vektorgenomkopien und Reinigungsmethode)?
  • Liegt Ihr Fokus auf struktureller Integrität, Variantenerkennung oder beidem?
  • Benötigen Sie Rohdaten für Ihre eigene Downstream-Analyse?

Workflow

Ein workflow mit minimalem Hands-on-Aufwand, entwickelt zur Erhaltung nativer AAV-Strukturen:

Bioinformatische Analyse

Unsere spezialisierte Pipeline rekonstruiert native und subgenomische Spezies:

  • Hochgenaue Konsensussequenzen vollständiger und subgenomischer Genome
  • Nachweis von Trunkierungen, Deletionen und Analyse der strukturellen Integrität
  • Analyse der ITR-Orientierung (Flip-Flop-Konfiguration)
  • Quantitative Aufschlüsselung aller Genomsubtypen
  • Visualisierungen auf Leseebene der strukturellen Zusammensetzung

Sie erhalten:

  • FASTA-Konsensussequenzen
  • Interaktive Genomkarte
  • Tabelle zur Variantenhäufigkeit
  • Zusammenfassung der ITR-Orientierung
  • Trunkierungsanalyse
  • Histogramm der Längendifferenz & Qualitätsbewertung
  • Optional: Rohdaten

Bearbeitungszeit

  • 1 Woche oder weniger ab Probeneingang bis zum Bericht
  • Inklusive Sequenzierung und vollständiger De-novo-Analyse

Probenanforderungen

Inputmenge:

  • Minimum: 1,0 × 10¹¹ Vektorgenome (VG) pro Probe
  • Empfohlen: 2–5 × 10¹¹ VG pro Probe
  • Volumen: bis zu 200 μl in gepufferter Salzlösung oder AAV-kompatiblem Puffer

Reinheit:

  • Muss frei von zellulärem Material sein
  • Idealerweise gereinigt mittels Affinitätsresin oder Ultrazentrifugation
  • Rohproben mit PEG-Fällung akzeptiert, wenn ≥2 × 10¹¹ VG